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本片以巴斯德为核心，串联起动物学、植物学、古生物学、微生物学、生物医学及现代生物技术等相关学科的有趣知识。延续《我的牛顿教练》《门捷列夫很忙》等纪录片的动画表现风格，以生动、幽默的叙事手法，将更多的生物学知识普及给观众。
城中村有一家只在深夜开业的小理发店。理发师毛头,年龄不详,身份不明,是一个工作时总戴着猫头鹰头套的怪人。　　毛头大部分时候都很懒散无拘束,标志性的穿着是上身正装下身裤衩。他手艺很差,剪不出好看的发型常常怪罪于客人颜值不够。　　来理发的客人不多,身上故事却不少。熟客里有最擅长让尸骨“开口说话”的法医刘八百和廖小刀、办案总是办到熟人身上的民警蒋述,和经历过上百个罪案的律师刘焱…….　　比起做生意挣钱,毛头更热衷于成为故事的搜集者。这些真实故事影响着毛头,让他理解人性和生活。现在他将这些故事带给更多人,帮助更多人认识活着意义和寻找人生价值。　　《毛头的深夜理发店》发布的所有内容都是原创动画，改编自非虚构的职业故事、真实案件、真实经历，并且均已获讲述者授权。
山田今日（坂本真绫 配音）和山田明日（金田朋子 配音）是一对感情十分要好的姐妹，虽然母亲早逝，可在父亲的关爱下，姐妹两人的生活尚且可以说是无忧无虑。可是，自从父亲背负了大笔债务人间蒸发后，美好的生活结束了，山田家陷入了水深火热之中。　　为了维持生计，今日干起了派送报纸的兼职，同时，勤劳懂事的明日小小年纪就担负起了家里的家务事宜，并利用一切机会赚取外快补贴家用。姐妹两的日子过得很辛苦，幸运的是，在她们周围，陪伴着一群善良又热情的朋友们。面冷心热的房东林源三（麦人 配音），小说家邻居三枝兰子（平松晶子 配音），大龄剩男一之仓正男（岸尾大辅 配音），所有的人都尽其所能的帮助这对贫穷的姐妹。善意和爱心在这个小镇上传递着。